网上的答案经常不靠谱
通常情况下我会使用 featureCounts 得到表达矩阵是 raw counts, 但总是有人需要我转换成各种形式,比如 RPKM, FPKM and TPM
概念见: https://statquest.org/2015/07/09/rpkm-fpkm-and-tpm-clearly-explained/
想偷一下懒,就搜索到了 这个答案: http://ny-shao.name/2016/11/18/a-short-script-to-calculate-rpkm-and-tpm-from-featurecounts-output.html
## functions for rpkm and tpm
## from https://gist.github.com/slowkow/c6ab0348747f86e2748b#file-counts_to_tpm-r-L44
## from https://www.biostars.org/p/171766/
rpkm <- function(counts, lengths) {
rate <- counts / lengths
rate / sum(counts) * 1e9
}
tpm <- function(counts, lengths) {
rate <- counts / lengths
rate / sum(rate) * 1e6
}
朋友提醒我,其实错了,因为很明显 colSums(exprSet_tpm)
并不是一百万。
其实我老早就写过TPM公式,就是RPKM的百分比的百万倍扩大值,所以还是自己动手重新写了代码。
rpkm <- function(counts, lengths) {
rate <- counts / lengths
rate / sum(counts) * 1e9
}
exprSet_rpkm=rpkm(exprSet,len)
exprSet_tpm=1e6*exprSet_rpkm/colSums(exprSet_rpkm)
不过,比较奇怪的是这个时候 colSums(exprSet_tpm)
是接近一百万,而不是精确的一百万,我还没有想清楚具体缘由,是不是R的计算小数点问题。
有关于的讨论: http://blog.nextgenetics.net/?e=51#body-anchor