2017两篇文章陆续发表在nature communication杂志，都是关于小鼠乳腺发育的，所以一起解读
首先是发表于2017年9月的NC，文章是;Construction of developmental lineage relationships in the mouse mammary gland by single-cell RNA profiling 系统性的跟踪检测了小鼠epithelial cells 的各种时期的单细胞转录组

背景知识

这篇文章提到，乳腺两种主要的细胞系：

• an inner layer of luminal cells that surround the lumen
• an outer layer of myoepithelial cells that lie in a basal position adjacent to the basement membrane.
  作者系统性的跟踪检测了小鼠epithelial cells 的各种时期的单细胞转录组情况：Here we present comprehensive single-cell transcriptomes of epithelial cells in the post-natal mouse mammary gland at different developmental stages spanning pre-puberty, puberty, adulthood and pregnancy, as well as at different points of the estrus cycle.
  我看到另外一篇文章(Cell Rep. 2016 Nov 15;) 提到正常的成年人的mammary gland 是由双层上皮细胞组成：
• Bipotent and myoepithelial progenitors are prominent and unique components of the outer (basal) layer.
• The inner (luminal) layer includes both luminal-restricted progenitors and a phenotypically separable fraction that lacks progenitor activity.
  简而言之，外层是basal，内层是luminal。其中luminal还可以细分成两类。作者就研究了这3类细胞，再加上 stromal cells, 总共4类细胞。 后面发表于2018年的《Nature Communications》的单细胞转录组研究“Profiling human breast epithelial cells using single cell RNA sequencing identifies cell diversity” 就说明了这一点。

  单细胞转录组测序

  利用了两个平台

• the 10X Genomics Chromium System for large-scale analyses
• the Fluidigm C1 platform for high-resolution sequencing.
  数据都在NCBI的GEO里面：GSE98131 (C1 data) and GSE103275 (10X data).

  首先用C1细致的看单细胞转录组水平

  测序的细胞数量如下,mammary gland 的3个发育时期共460个细胞，如下：

• pre-puberty (2 weeks; red)
• puberty (5 weeks; green, with TEBs in dark green)
• adulthood (10 weeks; black).
  这里面是混合了luminal和basal细胞系的，但是作者又单独使用C1平台针对10周的成年小鼠分别测了76个 purified luminal cells 和145个basal单细胞转录组数据。
  

  再使用10X看大量单细胞

  总共6个样本, 都在 GSE103275 ：
  | GSM2510616 | Adult basal cells |
  | —————————————————————————————— | ————————————— |
  | GSM2510617 | Adult epithelial cells |
  | GSM2759554 | Puberty epithelial cells_1 |
  | GSM2759555 | Puberty epithelial cells_2 |
  | GSM2759556 | Adult diestrus epithelial cells |
  | GSM2759557 | Adult estrus epithelial cells |

• GSE95430 Single cell RNA-seq of eight thousand epithelium cells from the mammary glands of adult mice
• GSE103272 Single cell RNA-seq of ten-thousand epithelium cells from the mammary glands of mice in puberty, estrus and diestrus phases
  

  4个怀孕阶段的小鼠乳腺发育

  还有一篇发表于2017年10月的NC文章：Differentiation dynamics of mammary epithelial cells revealed by single-cell RNA sequencing 也是做了类似的工作，用单细胞转录组测序来探索小鼠的乳腺发育情况，包括了4个发育阶段：

• nulliparous (NP) 未怀孕时期
• day 14.5 gestation (G) 妊娠期第14.5天
• day 6 lactation (L) 哺乳期第6天
• 11 days post natural involution (PI) 完全自然退化期第11天
  如图：
  
  选取四个时间点：NP、G、L和PI，每个时间点取两只小鼠，利用上皮特异性粘附分子（EpCAM）分选MECs。使用10× Chromium platform做单细胞转录组测序，共测量了23184个单细胞（相当于每个样本只有3千个单细胞，可能是早期10X实验质量不怎么样），分成15个cluster，测序情况是：an average of 6175 unique transcripts and 2118 genes detected from 25,010 cells (4223 in NP, 5826 in G, 9319 in L and 5642 in P) ，虽然细胞数量捕获不多，但是平均基因检测数量及测序深度还好。

  聚类

  basal marker Krt5 and the luminal marker Krt18
  
  全文集中在数据处理阶段，数据分布在 GEO (GSE106273)
  还制作了一个shiny网页帮助科学家探索其数据： http://marionilab.cruk.cam.ac.uk/mammaryGland.
  Code is available online at https://github.com/MarioniLab/MammaryGland.
  更重要的是，这个课题组在单细胞转录组数据处理方向做了很多工作;http://marionilab.github.io