单细胞测序都不配拥有姓名了吗

最近刷文献,发表在 October 7, 2019的PNAS的:Immune effector monocyte–neutrophil cooperation induced by the primary tumor prevents metastatic progression of breast cancer 粗略的看完了全文才发现里面居然是有单细胞转录组的。但是搜索全文,才出现5次single这个单词。
这篇文章的测序数据是公布的:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi?acc=GSE137300 表达矩阵及差异分析结果,都可以直接下载。

技术策略

出现了三次single这个单词的地方是在描述如何做这个单细胞转录组的,注意哦,并没有测序,是qPCR技术看指定基因的表达量。

为什么做单细胞转录组

说句实话,只要资金允许,现在单细胞技术成熟了,不做单细胞才需要解释为什么,做单细胞就是应该的!

差异分析,研究者关心的是不同地方的neutrophils的特性,所以比较取自于blood和lung的。

PCA看不同部位是否距离足够远。在不同的PDX模型里面,blood和lung的距离不一样,具体看文章哈。

热图,其实和PCA图是差不多的理解.

总结

虽然是单细胞转录组,但仅仅是96个基因,还是qPCR,并不是测序。基因也可以在 Table S2. List of 96 genes and corresponding mouse primers 找到。
如果你通读全文,会发现,研究者把这个单细胞转录组做了两次,针对

  • the highly metastatic tumors HCl-001 (TN1)
  • low metastatic tumors HCl-002 (TN2).
    不同的小鼠PDX模型,而且是结合bulk转录组测序的.
    测序策略是:

    GSM4074939 mRNA_Neutrophils_TN1 [tag_191]
    GSM4074940 mRNA_Neutrophils_TN1 [tag_482]
    GSM4074941 mRNA_Neutrophils_TN2 [tag_367]
    GSM4074942 mRNA_Neutrophils_TN2 [tag_706]
    GSM4074943 mRNA_Neutrophils_TN2 [tag_1341]
    GSM4074944 mRNA_Monocytes_CCR2+_TN1 [tag_191]
    GSM4074945 mRNA_Monocytes_CCR2+_TN1 [tag_482]
    GSM4074946 mRNA_Monocytes_CCR2+_TN2 [tag_367]
    GSM4074947 mRNA_Monocytes_CCR2+_TN2 [tag_706_]
    GSM4074948 mRNA_Monocytes_CCR2+_TN2 [tag_1341]
    

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