最近刷文献,发表在 October 7, 2019的PNAS的:Immune effector monocyte–neutrophil cooperation induced by the primary tumor prevents metastatic progression of breast cancer 粗略的看完了全文才发现里面居然是有单细胞转录组的。但是搜索全文,才出现5次single这个单词。
这篇文章的测序数据是公布的:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi?acc=GSE137300 表达矩阵及差异分析结果,都可以直接下载。
技术策略
出现了三次single这个单词的地方是在描述如何做这个单细胞转录组的,注意哦,并没有测序,是qPCR技术看指定基因的表达量。
为什么做单细胞转录组
说句实话,只要资金允许,现在单细胞技术成熟了,不做单细胞才需要解释为什么,做单细胞就是应该的!
差异分析,研究者关心的是不同地方的neutrophils的特性,所以比较取自于blood和lung的。
PCA看不同部位是否距离足够远。在不同的PDX模型里面,blood和lung的距离不一样,具体看文章哈。
热图,其实和PCA图是差不多的理解.
总结
虽然是单细胞转录组,但仅仅是96个基因,还是qPCR,并不是测序。基因也可以在 Table S2. List of 96 genes and corresponding mouse primers 找到。
如果你通读全文,会发现,研究者把这个单细胞转录组做了两次,针对
- the highly metastatic tumors HCl-001 (TN1)
- low metastatic tumors HCl-002 (TN2).
不同的小鼠PDX模型,而且是结合bulk转录组测序的.
测序策略是:GSM4074939 mRNA_Neutrophils_TN1 [tag_191] GSM4074940 mRNA_Neutrophils_TN1 [tag_482] GSM4074941 mRNA_Neutrophils_TN2 [tag_367] GSM4074942 mRNA_Neutrophils_TN2 [tag_706] GSM4074943 mRNA_Neutrophils_TN2 [tag_1341] GSM4074944 mRNA_Monocytes_CCR2+_TN1 [tag_191] GSM4074945 mRNA_Monocytes_CCR2+_TN1 [tag_482] GSM4074946 mRNA_Monocytes_CCR2+_TN2 [tag_367] GSM4074947 mRNA_Monocytes_CCR2+_TN2 [tag_706_] GSM4074948 mRNA_Monocytes_CCR2+_TN2 [tag_1341]