我这里选择的CHIP-seq文章题目是
CARM1 Methylates Chromatin Remodeling Factor BAF155 to Enhance Tumor Progression and Metastasis
文章链接http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1535610813005369
这是2013年的文章,算是蛮新的了,主要探究了CARM1这个基因
然后我简单搜索了一些这个基因的信息
9606 10498 CARM1
- PRMT4
MIM:603934|HGNC:HGNC:23393|
Ensembl:ENSG00000142453|HPRD:09158|Vega:OTTHUMG00000180699
19 19p13.2 coactivator-associated arginine methyltransferase 1
protein-coding CARM1 coactivator-associated arginine methyltransferase histone-arginine methyltransferase CARM1|protein arginine N-methyltransferase 4 20150308
该基因是多种肿瘤相关的转录因子的共激活剂(激活蛋白;转录辅助激活蛋白;转录共同活化子)。
文章作者做了以下四件事
Knockout of CARM1 Using ZFN in Breast Cancer Cells
Identification of BAF155 as a Novel CARM1 Substrate
Methylation of BAF155 Promotes Tumor Growth and Metastasis
Methylated BAF155 Gains Unique Chromatin Association
所以就有两种细胞,一种是野生型WT,一种是突变的MUT细胞
然后它们分别做了两个重复,一种是input一种是BAF155免疫测序。
CHIP-seq一定是有一个input对照文件,和一个真正的免疫共沉淀的测序文件。
这样就有八个测序文件。
我们随机挑选两个文件来跑一下CHIP-seq的流程吧,其中一个是.部分进行免疫共沉淀前的DNA(input DNA)作为空白对照。
5.5G Apr 30 10:31 Xu_WT_rep2_BAF155.fastq
18G Feb 13 20:37 Xu_WT_rep2_Input.fastq
然后我随便在网上找了一个生信分析流程
- 标准信息分析
a) 对测序数据进行base calling、raw data 数据整理及数据质量评估;
b) 去接头污染,去低质量reads和产量情况统计
c) Bisulfite 测序序列与参考基因组序列的比对
d) 深度和覆盖度分析
e) C 碱基的甲基化水平
f) 全基因组甲基化水平分布趋势 - g) 全基因组DNA甲基化图谱
- h) 差异性甲基化区域(DMR)分析
参考
http://www.plob.org/2012/09/29/3760.html
http://www.plob.org/2012/01/09/1605.html
http://www.plob.org/2012/01/08/1538.html